График работы компании: Пн-Пт с 9:00 до 18:00

| ул. Садовая-Спасская 20, стр.1 | ул. Пресненский Вал 14, с.3

Работаем: Пн-Пт с 9:00 до 18:00

Основные методы выделения ДНК

О том, что дезоксирибонуклеиновые кислоты могут содержать большой массив данных об особенностях видов, живущих на планете Земля, начали говорить в далеком 1869 году. Спустя полвека, британским ученым удалось воссоздать модель привычной обывателю двухцепочечной спирали генов, являющейся индивидуальным признаком живых и неживых существ.

А достижения современной генетики позволили внедрить различные методики выделения ДНК, упрощающие процедуру получения требуемых образцов из биологических материалов, пригодных для исследований. Разберемся, как происходит экстракция дезоксирибонуклеиновой кислоты и какие реагенты используются при выполнении этого процесса!

Известные методы выделения ДНК из биоматериала

Выбор методики для выделения клеток из биоматериалов животного или растительного происхождения зависит от:Известные методы выделения ДНК из биоматериала

  • Качества материалов, представленных для исследования;
  • Количества времени, отведенного на анализы;
  • Цели экспертизы, объема задач, ожидаемых результатов;
  • Дальнейшего применения полученных молекул.
  • Сегодня, для экстракции ДНК используют:

Диоксид кремния (силика). К имеющимся образцам добавляют гуанидинтиоцианат, соединения денатурируют, молекулы связывают с силикой, после чего происходит промывка, позволяющая избавиться от других компонентов. В последующем, молекула превращается в раствор, пригодный для проведения исследований;

Ионообменные смолы. Исследуемый биоматериал помещается в пробирку со смолой, закипающей под действием высоких температур. После центрифугирования, материал помещается на инкубацию в течение 30-40 минут;

Целлюлозные фильтры. Специальная бумага, пропитанная веществами-буферами, связывает нуклеиновые кислоты, денатурирует белки и защищает образцы лот ультрафиолета и нуклеаз;

Магнитные частицы. К исследуемому материалу добавляют магнитные шарики и особое лизирующее средство. Шарики «захватывают» выделившуюся дезоксирибонуклеиновую кислоту, остаточные клеточные элементы вымываются в процессе очищения;

Фильтрационные гели, сформированные из поперечно расположенных гранул, напоминающих сито. При пропуске образцов через колонку с гелем, вещества разделяются и проходят очистку этилом или фенол хлороформным средством.

При этом каждая из них обладает особенностями, нюансами и тонкостями, зависящими от объема поставленных задач.

Вне зависимости от выбранной методики, выделение ДНК требует тщательной подготовки рабочего места и лаборатории в целом. Предварительные мероприятия выглядят следующим образом:Реагенты для выделения ДНК

  • Обеззараживание рабочей поверхности, оборудования и штативов ультрафиолетом;
  • Обработка столов, полов, стен и потолков 70% этиловым спиртом и специальными моющими средствами;
  • Дезинфекция пластиковой посуды с помощью 10% раствора хлорной извести и 5% хлорамина в специальном контейнере на протяжении 24 часов до выделения;
  • Подготовка стерильной медицинской одежды, закрывающей тело сотрудника лаборатории.
  • Соблюдение мер предосторожности повышает точность результатов за счет исключения вероятности загрязнения полученных образцов.

Реагенты для выделения

Чаще всего, реактивы, используемые при очистке биоматериала для получения ДНК, готовятся непосредственно в лаборатории, перед проведением исследования. Тем не менее, ряд производителей предлагает готовые наборы, позволяющие выделять нужные цепочки вне специализированных клиник. Стоимость реагентов зависит от выбранной методики, срочности выполнения анализа и финансовых возможностей клиента.